關(guān)于色譜柱再生的一些問題說明

 

1、色譜柱在以下幾種情況必須再生處理

 

a.使一段時間，柱效明顯下降；

b.柱被污染，特別是在程序升溫時，基線漂移和噪聲超過容忍程度或出現(xiàn)“鬼峰”；

c.柱頭塌陷，柱床短路或斷位(在玻璃柱中容易發(fā)現(xiàn))，而出現(xiàn)尖峰或雙重峰；

d.峰形展寬，保留時間明顯變化；

e.待分離組分和固定相表面非特異性相互作用，引起保留時間較短的峰拖尾或出現(xiàn)雙峰；

 

2、毛細管柱再生的幾種方法

 

a.用載氣將色譜柱污染物沖洗出來；

b.將柱頭截去100mm 或更長一些；

c.若使用交聯(lián)的色譜柱，可在儀器上反復(fù)注射溶劑進行沖洗。常用的溶劑依次為丙酮、甲苯、乙醇、氯仿和二氯甲烷，每次可進樣5～10μL；

d.交聯(lián)柱在儀器上沖洗無效時，可把柱拆下來用二氯甲烷或氯仿沖洗，溶劑用量視柱的污染程度而定，一般20mL 左右。

 

3、色譜柱再生前應(yīng)注意的問題

 

當(dāng)分析出現(xiàn)問題時，不能只考慮是柱問題，而馬上進行再生。除上述情況外，還應(yīng)考慮樣品處理、進樣技術(shù)、操作有無失誤、數(shù)據(jù)處理參數(shù)有無改變等可能帶來的問題。

a.襯管、預(yù)柱和檢測器被污染也會引起基線不穩(wěn)定、出現(xiàn)“鬼峰”或裂解峰；

b.新的注射墊也會引起基線漂移和出現(xiàn)“鬼峰”；

c.襯管密封欠佳、柱安裝死體積或檢測器固有特性也會引起較早出現(xiàn)峰的拖尾；

d.分析系統(tǒng)發(fā)生變化(如漏氣嚴(yán)重)也可能使保留時間突變；

e.峰變寬，除柱效下降外也可能由柱外效應(yīng)引起；

f.進樣量太大也會引起峰變寬、拖尾或保留時間變短；

g.色譜柱長時間樣品過載，保留時間也會變小等。

 

4、色譜柱再生時應(yīng)注意的幾個問題

 

a.如前所述和色譜柱老化一樣，不是溫度越高越好，時間越長越好；建議不要使用長時間烘烤的方法，來處理受到污染的色譜柱，因為烘烤時，溫度會把污染的殘留物變成不能溶解的物質(zhì)，再用溶劑清洗也無濟于事；

b.儀器在高靈敏度操作時，如：量程在1×10-11A/mV以下，痕量分析程序升溫過程中，溫度升到大于180℃后，基線明顯漂移是不可避免的；

c.不同類型柱子，再生方法不同；

d.樣品種類、組分、進樣量不同或操作時間長短不同，再生方法也不同；

e.儀器本身條件如：氣源種類、純度、凈化條件、進樣口結(jié)構(gòu)和操作檢測器不同，再生柱方法也有區(qū)別；

f.高分子量組分污染色譜柱后，高溫再生時間長會導(dǎo)致固定相的老化；使用交聯(lián)或鍵合柱最好用溶劑漂洗再生，漂洗溶劑流動方向一定要從柱出口注入。應(yīng)該注意，毛細管柱交聯(lián)鍵合率通常不到90%，因此會漂洗掉未化學(xué)結(jié)合的液相部分，所以保留時間和分離狀態(tài)會有所變化；

g.對于難揮發(fā)物，碳化物是不能通過再生除去，對于填充柱最好使用帶襯管氣化室進樣器，對于毛細管可通過把柱入口切去30～50cm的方法除去污物段。有條件的可以使用預(yù)柱，把不揮發(fā)的有機物、無機物和顆粒材料阻留在預(yù)柱中，需要時更換預(yù)柱；

h.在某些情況下，色譜柱要在溫度極限附近使用，這時基線漂移和大噪聲已不可避免，柱的再生要求只能視情況而定；

i.不是所有色譜柱通過再生均能恢復(fù)原來性能。