島津液相色譜柱的使用方法涉及多個步驟

　　島津液相色譜柱是一款新開發的高純硅膠液相色譜柱。具有高分離度、高惰性、高柱效、耐污染等特點，該系列色譜柱可在較寬pH范圍、較高比例水相流動相條件下穩定使用。廣泛適用于食品、藥品、環境等多個領域的分析檢測項目。其通過優化的表面鍵合密度，在保證良好分離效果的前提下，可提供適中的疏水作用力，化合物洗脫更快，分析效率更高。在與島津高分離度系列VP-ODS和GIS C18的對比實驗中可以看到，使用SHIMSEN Ankylo C18色譜柱可獲得相當的分離效果，同時出峰更迅速。柱效更高，峰形也更尖銳。

　　島津液相色譜柱的使用方法涉及多個步驟，以下是詳細的操作指南：

　　一、前期準備

　　選擇合適的色譜柱

　　根據樣品的化學性質選擇色譜柱類型。如分析極性化合物可選擇反相色譜柱（如C18柱），非極性化合物可選擇正相色譜柱（如硅膠柱）。

　　考慮色譜柱的柱長、內徑和粒度等參數。柱長影響分離度，內徑決定流速和進樣量，粒度與柱效有關。一般較長、較細粒度的色譜柱有更高的分離能力，但壓力也相對較大。

　　配置流動相

　　精確稱取或量取所需溶劑，按比例混合。例如，對于反相色譜常用的甲醇-水或乙腈-水體系，要注意溶劑的純度和混合均勻性。

　　對流動相進行過濾和超聲脫氣。使用0.45μm或更小孔徑的濾膜過濾，以去除雜質；超聲脫氣時間一般為15-30分鐘，避免流動相中存在氣泡影響泵的工作和檢測準確性。

　　準備樣品

　　樣品要溶解在合適的溶劑中，且溶劑要與流動相互溶，避免產生沉淀或導致色譜柱堵塞。

　　樣品溶液的濃度要適中，一般根據檢測器的靈敏度和色譜柱的負載能力來確定，通常在mg/mL到μg/mL級別。

　　樣品溶液同樣需要過濾，以防止固體顆粒進入色譜柱。

　　二、裝柱與連接

　　安裝色譜柱

　　將色譜柱安裝在液相色譜儀的柱溫箱內指d位置，確保色譜柱兩端的接頭與儀器的管路連接緊密，防止漏液。

　　注意色譜柱的方向，一般入口端標記為“In”，出口端標記為“Out”，不要接反。

　　連接管路

　　按照儀器說明書的要求，將流動相的管路連接到色譜柱的入口端，將色譜柱的出口端連接到檢測器。

　　檢查所有連接是否牢固，可適當擰緊接頭，但不要過度用力以免損壞色譜柱或管路。

　　三、系統平衡

　　沖洗色譜柱

　　用較低流速（一般0.1-0.5mL/min）的流動相沖洗色譜柱，沖洗體積約為色譜柱體積的10-20倍。目的是去除色譜柱內可能存在的雜質和保存液。

　　觀察柱壓和流出液的情況，確保柱壓穩定，流出液無異常顏色或雜質。

　　平衡色譜柱

　　逐漸增加流動相流速到設定的分析流速，繼續沖洗色譜柱，直到基線穩定。這個過程可以使色譜柱內的固定相達到充分的平衡狀態，保證分離效果的重復性。

　　平衡時間因色譜柱類型和流動相組成而異，一般需要30分鐘到數小時不等。

　　四、進樣分析

　　設置進樣參數

　　根據樣品性質和分析要求，在儀器控制軟件上設置進樣量、進樣速度等參數。進樣量要合適，過大會超過色譜柱負載能力，導致峰形展寬；過小則可能檢測不到足夠的信號。

　　選擇合適的進樣方式，如手動進樣或自動進樣。手動進樣時要注意進樣針的操作規范，避免帶入空氣或污染樣品。

　　啟動分析

　　點擊儀器控制軟件上的“開始”按鈕，啟動泵輸送流動相，同時進樣閥切換將樣品注入色譜柱。

　　觀察基線和峰形變化，記錄色譜圖。分析過程中要保持流動相流速、柱溫等條件的穩定。

　　五、清洗與維護

　　清洗色譜柱

　　每次分析完成后，用適當的溶劑沖洗色譜柱。對于反相色譜柱，可先用強溶劑（如甲醇或乙腈）沖洗，然后換用弱溶劑（如水）；對于正相色譜柱，可先用正己烷等非極性溶劑沖洗，后用極性稍強的溶劑。

　　清洗時間一般為色譜柱體積的3-5倍，以去除樣品殘留。

　　再生色譜柱

　　當色譜柱的性能下降，如出現峰形變寬、保留時間改變或柱壓升高等情況時，需要進行再生。

　　再生方法因色譜柱類型而異。對于反相色譜柱，可嘗試用1-2M的NaOH溶液沖洗，然后用水和甲醇依次沖洗；對于正相色譜柱，可用適當的酸或堿溶液處理。再生后要充分水洗和平衡后再使用。

　　儲存色譜柱

　　如果長時間不使用色譜柱，要將色譜柱從儀器上取下，清洗干凈后，充滿合適的保存液（如甲醇或乙腈），兩端密封好，放置在陰涼干燥處保存。