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        液相色譜柱在操作方面也是有些技巧的

        更新時間:2025-10-22  |  點擊率:180
          液相色譜柱是液相色譜儀(HPLC、UHPLC等)的核心部件,用于實現樣品中各組分的分離。它通常是一個裝填有固定相的圓柱形壓力容器,由不銹鋼、鈦合金或其他耐壓、耐腐蝕材料制成,內部填充有特定性質的顆粒狀填料,如硅膠基質鍵合相、聚合物基質填料等。
          液相色譜柱的分離基于樣品中各組分在固定相和流動相(液體溶劑)之間分配行為的差異。當流動相攜帶樣品通過色譜柱時,不同組分因與固定相的相互作用力(如吸附、分配、離子交換、尺寸排阻等)不同,在色譜柱中的遷移速度產生差異,從而實現分離。與固定相作用強的組分遷移慢、保留時間長;作用弱的組分遷移快、保留時間短。最終,不同組分按順序從色譜柱出口流出,被檢測器檢測并記錄,形成色譜峰。
          液相色譜柱的操作步驟:
          1、使用前的檢查和須知事項
          檢查色譜柱的狀態:在使用之前,檢查色譜柱是否有物理損傷或泄漏。
          確認色譜柱的信息:了解色譜柱的型號、粒徑、內徑、長度以及適用的pH范圍和溫度限制。
          查閱說明書:根據廠家提供的說明書來確定正確的操作方法和注意事項。
          2、色譜柱的安裝
          連接色譜柱:按照流動方向(通常標記為箭頭)正確地將色譜柱連接到系統中。確保接頭與柱頭深度匹配,避免產生死體積或漏液。
          過渡溶劑:如果新柱保存溶劑與即將使用的流動相不兼容,則需要先用適當的過渡溶劑沖洗色譜柱,以防止固定相溶解或沉淀。
          3、系統的沖洗和平衡
          沖洗管路:在連接色譜柱之前,應首先沖洗整個流路系統,去除可能存在的氣泡或其他污染物。
          平衡色譜柱:將色譜柱連接好后,需要用目標流動相或相似的溶劑對色譜柱進行沖洗,直到基線平穩為止。這一步驟有助于排除色譜柱中的空氣,并確保色譜柱內部充滿合適的溶劑。
          4、樣品的準備
          樣品過濾:所有待分析的樣品都需要經過0.22μm或更細孔徑的濾膜過濾,以去除顆粒物質,避免堵塞色譜柱。
          稀釋樣品:必要時對樣品進行適當稀釋,以適應檢測器的靈敏度要求。
          5、進樣分析
          進樣量:選擇合適的進樣量,通常不超過色譜柱容量的10%。
          進樣方式:可以采用手動進樣或自動進樣器進樣,具體取決于儀器配置和個人偏好。
          6、數據采集與解析
          設定參數:設置工作站上的參數,如流速、柱溫、檢測波長和流動相比例等。
          實時監控:啟動液相色譜儀,開始數據采集,并實時監控壓力曲線和基線信號是否正常。
          7、關機與維護
          清洗色譜柱:分析結束后,需用高比例水相流動相沖洗色譜柱,隨后再用有機相徹d清洗,以防鹽分殘留導致色譜柱損壞。
          保存色譜柱:長期不用時,應將色譜柱保存在推薦的溶劑中,并密封兩端,防止污染。
          填寫記錄:完成實驗后,記得填寫儀器使用記錄,清理工作臺面并處理廢液。

        液相色譜柱

         

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